whycomputer.com >> Wiedza o Internecie >  >> Sprzęt komputerowy

Typy mikroskopów fluorescencyjnych

W momencie wynalezienia mikroskopu pod koniec XVI wieku, filozofowie przyrody po raz pierwszy zajrzeli w mikroskopijny świat. Dzięki małym, silnie wypukłym soczewkom skonstruowanym przez Antoniego van Leeuwenhoeka, ujrzeli bakterie, komórki krwi, protisty i strukturę komórek roślin. Od tamtej pory naukowcy zadają sobie pytanie: co tak naprawdę widzimy przez soczewkę? Mikroskopia fluorescencyjna eliminuje tę niepewność – pod wpływem światła próbka sama emituje charakterystyczne światło.

Epifluorescencja

Najbardziej powszechną konfiguracją jest mikroskop epifluorescencyjny. Źródło światła (zwykle lampa rtęciowa lub ksenonowa) przechodzi przez filtr dobierający wąski zakres długości fal, po czym oświetla preparat przez obiektyw. Fluorofory w próbce pochłaniają krótsze fale i emitują dłuższą, widoczną jako fluorescencję. Emitowane światło oraz rozproszone światło powraca przez obiektyw do detektora lub oka; kolejny filtr blokuje światło oświetlające, pozostawiając jedynie sygnał fluorescencji.

Mikroskopia konfokalna

Mikroskop epifluorescencyjny zbiera światło ze wszystkich warstw pola widzenia, co wprowadza nieostre tło. Mikroskop konfokalny rozwiązuje ten problem, koncentrując wiązkę laserową w płaszczyźnie ogniskowej i umieszczając otwór (pinhole) przed detektorem, który blokuje światło pochodzące spoza ogniskowej warstwy. Przesuwając wiązkę po próbce, uzyskuje się czysty obraz trójwymiarowy.

Mikroskopia multiphotonowa

Konfokalny układ wymaga precyzyjnego ustawienia wszystkich elementów. Mikroskop multiphotonowy unika tego, wykorzystując laser o długości fali dwukrotnie większej niż wymagana do pojedynczej ekscytacji fluoroforów. Fluorofory zostają pobudzone jedynie wtedy, gdy dwa fotony uderzą je jednocześnie w bardzo małym ognisku laserowym. W efekcie emisja zachodzi wyłącznie w miejscu ogniskowania, co eliminuje potrzebę otworu i zapewnia bardzo czysty obraz.

Fluorescencja całkowitego wewnętrznego odbicia (TIRF)

Technika TIRF ogranicza głębokość penetracji światła, kierując je pod kątem tak, aby w szkle całkowicie się odbijało. Niewielka część fali „przecieka” do bardzo cienkiej warstwy przy powierzchni szkła, ekscytując fluorofory jedynie w tym wąskim obszarze. Dzięki temu uzyskuje się obrazy o wysokim kontraście, idealne do badania struktur przy powierzchni komórek, np. neuronów przytwierdzonych do szklanej płytki.

Superrozdzielczość

Wszystkie mikroskopy, także fluorescencyjne, są ograniczone przez dyfrakcję światła – minimalny rozmiar ogniska wynosi około 200 nm. Jednak wiele struktur biologicznych jest mniejszych. Metody superrozdzielczości, takie jak mikroskopia strukturalnego oświetlenia (SIM) czy deplecja emisji stymulowanej (STED), zmniejszają rozmiar ogniska ekscytacji, pozwalając na obserwację detali poniżej granicy dyfrakcji.


URL:https://pl.whycomputer.com/sprzet/100307040.html

Sprzęt komputerowy
  • Rodzaje linii gazu propanowego – przegląd i zasady bezpieczeństwa

    Rodzaje linii gazu propanowegoLinie gazu propanowego produkowane są z różnych materiałów, takich jak miedź czy tworzywa sztuczne. Dzięki wytrzymałym i długowiecznym rurkom można je instalować zarówno w domach, jak i w obiektach komercyjnych. Gaz jest transportowany przez instalacje umieszczone w ści

  • Przewodnik dla początkujących po aperturze

    Apertura (przysłona) to najczęściej niezrozumiane ustawienie w aparacie. Podczas gdy prędkość migawki i ISO są proste – zbyt długi czas otwarcia rozmywa zdjęcie, a zbyt wysoki ISO wprowadza szum – przysłona wymaga nieco głębszego wyjaśnienia. Poniżej znajdziesz przystępny opis, który pomoże Ci ją op

  • Typy taśm przenośnikowych

    Wynalezienie taśm przenośnikowych zrewolucjonizowało procesy produkcyjne w wielu branżach na całym świecie. To proste urządzenie – gumowa taśma rozciągnięta między dwoma walcami – umożliwia przemieszczanie części, materiałów i gotowych produktów, co znacznie obniża koszty pracy i oszczędza czas. Taś

Wiedza o Internecie © https://pl.whycomputer.com